C18色譜柱的活化及維護方法

在液相色譜實驗中，C18色譜柱是常見的一種反相色譜柱。以下是對該柱子進行活化和維護的方法：

1. 活化新柱

1. 防脫殼處理：將新柱浸入純甲醇或乙腈溶液中，旋轉或以其它方式使其表面完·全接觸至少30分鐘。洗去大部分殘留有機物之后，用純水或75％甲醇或乙腈沖洗2-3次直到輸出液為無色無味水平。

2. 酸堿洗處理：在防脫殼處理完成后，使用0.1-1%的醋酸溶液滴于色譜柱表面并停留約30分鐘，并徹·底用DI水沖洗干凈。然后采用0.1-1%的氨水溶液吸附含氨基的樣品于柱子上并停留約30分鐘，Z后再次用DI水推出至輸出穩(wěn)定后即可。

3. 有機物處理：加入摩爾比1:1的異丙醇和甲酸制成的混合液進柱子中，在流速為0.5 mL/min的條件下梯度洗脫（10% B, 3min; 40% B, 3min; 95% B, 3min，重置至10%過渡三分鐘），使其開放性自由膠體的更快恢復。

注意，活化步驟而區(qū)地直到輸出液為無色無味水平，這一點比較關鍵。如果您在某些步驟中出現了問題，例如未完·全去除殘留有機物、洗滌溶劑未嚴格控制等，可能會影響到Z終結果。因此，對于分析靈敏性和分辨率較高的分析，請盡可能保持每個步驟的準確性和一致性。

2. 柱子的維護

1. 保持潔凈：用高純度水、其他常見的有機溶劑進行沖洗，去除表面殘留樣品、鹽和溶液等物質。

2. 防止干燥：建議如果長期不使用反相色譜柱，注滿一定比例的溶劑并密封。

3. 正確使用：使用時應避免太高或太低的流量，以及過強的壓力。不使用時封住兩端，避免雜質進入。

記得，C18色譜柱的使用壽命大約為100~200次，當輸出結果的峰形變得模糊、輸出穩(wěn)定性下降時，請及時更換新柱。